Vibrio cholerae için LyoDt® Dondurma Kurutulmuş Gerçek Zamanlı PCR Deteksi Reagent O1/O139 - Soğuk Zincir Gerekmiyor ve Tek Test Önceden Verildi

LyoDt^® Dondurulmuş Kurutulmuş Gerçek Zamanlı PCR İçin Algılama Reaktif Vibrio cholerae O1/O139

Kullanım’Kılavuzu

1. AÇIKLAMA

Vibrio cholerae kolera hastalığına neden olan, hızlı başlangıçlı, yüksek bulaşıcılığa ve önemli ölüm oranlarına sahip akut bir bağırsak enfeksiyon hastalığına neden olan Gram negatif bir bakteridir. Uluslararası Sağlık Düzenlemeleri kapsamında karantinaya alınabilir bir hastalık olarak, öncelikle O1 ve O139 serogruplarını içerir＜ 

Bu ürün, dondurulmuş kurutulmuş bir gerçek zamanlı PCR reaktifidir için tespiti Vibrio cholerae O1/O1＜ Yüksek oranda korunmuş rfb genini kullanır Vibrio cholerae O1/O1 tespit hedefi olarak. Şablon DNA hariç tüm gerekli bileşenleri içeren bir mastermix'tir ve kolay kullanım için PCR tüplerinde tek test olarak önceden dağıtılmıştır. Bu ürün, nakliye ve depolama için soğuk zincir gerektirmez, bu da nakliye maliyetini önemli ölçüde azaltır ve reaktif israfı ve aerosol kontaminasyonu nedeniyle olası kayıpları ortadan kaldırır.

2. ÖZELLİKLER VE BİLEŞİM

3. DEPOLAMA VE RAF ÖMRÜ

Saklayın ortam sıcaklığında (5-304560°C'de floresan ve pasif referans olarak HİÇBİRİ'ni seçin.＜ 12 aya kadar kararlıdır＜ Vakum paketi açıldıktan sonra, lütfen kullanılmayan ürünleri sağlanan yeniden kapatılabilir plastik torbada kurutucu maddelerle birlikte saklayın, ve alüminyum folyo torbada. 

DİKKAT: 

Reaktif peletinin küçülmesi, tüpe nem sızdığının ve reaktifin nemlendiğinin bir göstergesidir. Normalden önemli ölçüde daha küçük pelet boyutuna sahip herhangi bir reaktif, numune testi için kullanılmadan önce atılmalı veya pozitif kontrol ile test edilmelidir .   4. GEREKLİ EK EKİPMANLAR VE REAKTİFLER

1) 

A2) 

Pozitif kontrol, rehidrasyondan önce ortam sıcaklığında saklanabilir ve uçlar3) Nükleaz

Mserbest su4) Nükleik asit ekstraksiyon kiti

Reaksiyon hacmini 25μl olarak ayarlayın ve PCR amplifikasyon prosedürünü aşağıda belirtildiği gibi ayarlayın. FAM toplayınABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600

.

6. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELER＜

,

vb.7. İŞLEM PROSEDÜRÜ 1) 

Nükleik

Asit ve xtraksiyonEkstre DNA

 numunelerden uygun bir ekstraksiyon kiti kullanarak. Önerilir ki DNA yaklaşık 100μl elüsyon tamponu ile elüe edilir (TEeğer nükleaz içermeyen H 2O_{15-20 saniye boyunca düşük hızda vortekslenir ve 15-20 saniye boyunca düşük hızda santrifüjlenir. Hemen kullanın veya saklayın} son adımda 60°C'de floresan ve pasif referans olarak HİÇBİRİ'ni seçin.. Saflaştırılmış nükleik asit hemen kullanılmalı veya -20°C'de saklanmalıdır. kullanımdan önce rehidre edilmelidir Pozitif Kontrol Hazırlama

Pozitif kontrol, rehidrasyondan önce ortam sıcaklığında saklanabilir12 aya kadar

.  O kullanımdan önce rehidre edilmelidir ekleyerek 250 μl TE tamponu veya nükleaz içermeyen H2O, _{15-20 saniye boyunca düşük hızda vortekslenir ve 15-20 saniye boyunca düşük hızda santrifüjlenir. Hemen kullanın veya saklayın} -20°C.45＜

Mix HazırlıkA) Vakum paketini açın ve reaktifi içeren 8 tüplü şeridi çıkarıns

 . Peletin tüpün dibinde olup olmadığını kontrol edin(Gerekirse tüp sayısını kesin eğer gerekli ). Sağlanan tüpler cihazınızla uyumlu değilse, reaktif peletini cihazınızla uyumlu bir optik tüpe aktarın.60°C'de floresan ve pasif referans olarak HİÇBİRİ'ni seçin.Bileşen

Hac. /test

PCR'yi gerçek zamanlı PCR için uygun kapaklarla (şeritler) kapatın

(sağlanmamıştır).D) Tüpleri 10~15 saniye boyunca düşük hızda vorteksleyin ve 20 saniye boyunca 3000 rpm'de santrifüjleyin ve bir gerçek zamanlı PCR cihazına yerleştirin.4) 

RT-PCR Kurulumu

Reaksiyon hacmini 25μl olarak ayarlayın ve PCR amplifikasyon prosedürünü aşağıda belirtildiği gibi ayarlayın. FAM toplayın (için

O1)negatif. (için O139)  60°C'de floresan ve pasif referans olarak HİÇBİRİ'ni seçin.CTSıcaklık

Analizi ve Yorumlama  Şablon