| Adedi: | 960T |
| fiyat: | USD |
| standard packaging: | 48T/poşet |
| Delivery period: | Sipariş miktarına bağlı olarak |
| Ödeme yöntemi: | L/C,T/T |
| Supply Capacity: | 20.000test/aylık |
LyoDt® Dondurulmuş Kurutulmuş Gerçek Zamanlı PCR İçin Algılama Reaktif Test
Kullanım’Kılavuzu
1. AÇIKLAMA
Test, Gram-pozitif küçük bir basil olup, öncelikle dışkı-ağız yoluyla bulaşan bir zoonotik patojendir. Ek olarak, göz teması veya hasarlı cilt/mukoza zarları yoluyla da vücuda girebilir. Enfeksiyon tipik olarak septisemi, menenjit ve monositoz olarak ortaya çıkar.
Bu ürün, Listeria monocytogenes türünün tespiti için dondurulmuş kurutulmuş gerçek zamanlı PCR reaktifidir.Test genini Listeria monocytogenes tespit hedefi olarak kullanır.Test 2. ÖZELLİKLER VE BİLEŞİM Katalog No.
Açıklama
|
MİKTAR |
FP- |
FD |
|
-036. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELERPozitif Kontrol |
® Dondurulmuş Kurutulmuş Gerçek Zamanlı PCR Algılama Reaktifi Listeria monocytogenes48Test |
FP- FD |
|
-036. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELERPozitif Kontrol1 |
Tüp |
A Yeniden kapatılabilir plastik torba |
|
1 torba |
3. DEPOLAMA |
VE RAF ÖMRÜ |
Ortam sıcaklığında saklayın (5-30
°C) .orumlama23μl DİKKAT: . 4. GEREKLİ EK EKİPMAN VE REAKTİFLER1)
Gerçek zamanlı PCR cihazı
2) Pipet ve uçlar
3)
DNA-
24) Nükleik asit ekstraksiyon kiti5. UYUMLU GERÇEK ZAMANLI PCR SİSTEMLERİ
gerekliyse.6. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELERGıda zenginleştirme suyu, kusmuk, ishal numuneleri vb.
31)
Nükleik
A
E
kstraksiyon
Uygun bir ekstraksiyon kiti kullanarak numunelerden
DNA ekstrakte edin. Negatif kontrolekstraksiyonun son adımında yaklaşık 100μl elüsyon tamponu (TEveya
nükleaz içermeyen H2O) ile elüe edilmesi önerilir. Saflaştırılmış nükleik asit hemen kullanılmalı veya -20°C'de saklanmalıdır.(2μl)Pozitif Kontrol Hazırlama Pozitif kontrol, rehidrasyondan önce ortam sıcaklığında12 aya kadarA) Vakum paketini açın ve reaktifi içeren 8 tüplü şeridi çıkarınKullanmadan önce23μlμl TE tamponu veya n -20H
2O
ekleyerek rehidre edilmelidir, düşük hızda 15-20 saniye vortekslenir ve düşük hızda 15-20 saniye santrifüjlenir. Hemen kullanın veya -20°Cde saklayın.3) Gerçek Zamanlı PCR Karışımı HazırlamaA) Vakum paketini açın ve reaktifi içeren 8 tüplü şeridi çıkarıns . Peletin tüpün dibinde olup olmadığını kontrol edin(orumlama
gerekliyse). Sağlanan tüpler cihazınızla uyumlu değilse, reaktif peletini cihazınızla uyumlu bir optik tüpe aktarın.B) Tüpleri açın ve kapağı/kapakları atın (gerçek zamanlı PCR makineleri için uygun değildir) ve reaksiyon karışımını buz üzerinde aşağıdaki gibi hazırlayın.BileşenHacim / test
Dondurulmuş kurutulmuş reaktif1 tüp (2μl)Şablon DNA/Pozitif Kontrol/Negatif Kontrol*23μlToplam
25μl
|
* Negatif kontrol olarak nükleaz içermeyen su kullanılabilir. |
C) |
|
PCR'yi gerçek zamanlı PCR için uygun kapaklarla (şeritler) kapatın |
(sağlanmamıştır).D) Tüpleri düşük hızda 10~15 saniye vorteksleyin ve 3000 rpm'de 20 saniye santrifüjleyin ve gerçek zamanlı bir PCR cihazına yerleştirin.4) |
|
RT-PCR KurulumuReaksiyon hacmini 25μl olarak ayarlayın ve PCR amplifikasyon prosedürünü aşağıda belirtildiği gibi ayarlayın. 60°C'de FAMfloresansını toplayın ve pasif referans olarak HİÇBİRİNİ seçin. |
Adım |
|
Sıcaklık |
Süre |
Döngü
Ön denatürasyon94
°C
3dakika
1 Amplifikasyon
|
9 |
4 |
°C |
10 saniye |
|
45 |
ve Yorumlamaorumlama |
5) Sonuç |
A |
|
nalizi |
ve Yorumlamaorumlama |
|
Şablon |
|
CT |
YorumlamaPozitif kontrol |
CT≤35Reaktif iyi.Negatif kontrolCT>40 veya CT yokKontaminasyon yok, deney geçerli.CT<35
|
Çapraz kontaminasyon, deney geçersiz.35 |
< |
Aerosol PCR kontaminasyonu, şüpheli (gri alan) numunelerin tekrar test edilmesi gerekir. |
|
Numune |
Listeria |
Listeria |
|
pozitif |
|
35 |
|
<C |
T |
|
|
Listeria |
şüpheli, tekrar test ile doğrulayın. |
|
|
CT>40 veya CT yok |
Listeria |
|
|
|
|
|
|
|
|
| Adedi: | 960T |
| fiyat: | USD |
| standard packaging: | 48T/poşet |
| Delivery period: | Sipariş miktarına bağlı olarak |
| Ödeme yöntemi: | L/C,T/T |
| Supply Capacity: | 20.000test/aylık |
LyoDt® Dondurulmuş Kurutulmuş Gerçek Zamanlı PCR İçin Algılama Reaktif Test
Kullanım’Kılavuzu
1. AÇIKLAMA
Test, Gram-pozitif küçük bir basil olup, öncelikle dışkı-ağız yoluyla bulaşan bir zoonotik patojendir. Ek olarak, göz teması veya hasarlı cilt/mukoza zarları yoluyla da vücuda girebilir. Enfeksiyon tipik olarak septisemi, menenjit ve monositoz olarak ortaya çıkar.
Bu ürün, Listeria monocytogenes türünün tespiti için dondurulmuş kurutulmuş gerçek zamanlı PCR reaktifidir.Test genini Listeria monocytogenes tespit hedefi olarak kullanır.Test 2. ÖZELLİKLER VE BİLEŞİM Katalog No.
Açıklama
|
MİKTAR |
FP- |
FD |
|
-036. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELERPozitif Kontrol |
® Dondurulmuş Kurutulmuş Gerçek Zamanlı PCR Algılama Reaktifi Listeria monocytogenes48Test |
FP- FD |
|
-036. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELERPozitif Kontrol1 |
Tüp |
A Yeniden kapatılabilir plastik torba |
|
1 torba |
3. DEPOLAMA |
VE RAF ÖMRÜ |
Ortam sıcaklığında saklayın (5-30
°C) .orumlama23μl DİKKAT: . 4. GEREKLİ EK EKİPMAN VE REAKTİFLER1)
Gerçek zamanlı PCR cihazı
2) Pipet ve uçlar
3)
DNA-
24) Nükleik asit ekstraksiyon kiti5. UYUMLU GERÇEK ZAMANLI PCR SİSTEMLERİ
gerekliyse.6. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELERGıda zenginleştirme suyu, kusmuk, ishal numuneleri vb.
31)
Nükleik
A
E
kstraksiyon
Uygun bir ekstraksiyon kiti kullanarak numunelerden
DNA ekstrakte edin. Negatif kontrolekstraksiyonun son adımında yaklaşık 100μl elüsyon tamponu (TEveya
nükleaz içermeyen H2O) ile elüe edilmesi önerilir. Saflaştırılmış nükleik asit hemen kullanılmalı veya -20°C'de saklanmalıdır.(2μl)Pozitif Kontrol Hazırlama Pozitif kontrol, rehidrasyondan önce ortam sıcaklığında12 aya kadarA) Vakum paketini açın ve reaktifi içeren 8 tüplü şeridi çıkarınKullanmadan önce23μlμl TE tamponu veya n -20H
2O
ekleyerek rehidre edilmelidir, düşük hızda 15-20 saniye vortekslenir ve düşük hızda 15-20 saniye santrifüjlenir. Hemen kullanın veya -20°Cde saklayın.3) Gerçek Zamanlı PCR Karışımı HazırlamaA) Vakum paketini açın ve reaktifi içeren 8 tüplü şeridi çıkarıns . Peletin tüpün dibinde olup olmadığını kontrol edin(orumlama
gerekliyse). Sağlanan tüpler cihazınızla uyumlu değilse, reaktif peletini cihazınızla uyumlu bir optik tüpe aktarın.B) Tüpleri açın ve kapağı/kapakları atın (gerçek zamanlı PCR makineleri için uygun değildir) ve reaksiyon karışımını buz üzerinde aşağıdaki gibi hazırlayın.BileşenHacim / test
Dondurulmuş kurutulmuş reaktif1 tüp (2μl)Şablon DNA/Pozitif Kontrol/Negatif Kontrol*23μlToplam
25μl
|
* Negatif kontrol olarak nükleaz içermeyen su kullanılabilir. |
C) |
|
PCR'yi gerçek zamanlı PCR için uygun kapaklarla (şeritler) kapatın |
(sağlanmamıştır).D) Tüpleri düşük hızda 10~15 saniye vorteksleyin ve 3000 rpm'de 20 saniye santrifüjleyin ve gerçek zamanlı bir PCR cihazına yerleştirin.4) |
|
RT-PCR KurulumuReaksiyon hacmini 25μl olarak ayarlayın ve PCR amplifikasyon prosedürünü aşağıda belirtildiği gibi ayarlayın. 60°C'de FAMfloresansını toplayın ve pasif referans olarak HİÇBİRİNİ seçin. |
Adım |
|
Sıcaklık |
Süre |
Döngü
Ön denatürasyon94
°C
3dakika
1 Amplifikasyon
|
9 |
4 |
°C |
10 saniye |
|
45 |
ve Yorumlamaorumlama |
5) Sonuç |
A |
|
nalizi |
ve Yorumlamaorumlama |
|
Şablon |
|
CT |
YorumlamaPozitif kontrol |
CT≤35Reaktif iyi.Negatif kontrolCT>40 veya CT yokKontaminasyon yok, deney geçerli.CT<35
|
Çapraz kontaminasyon, deney geçersiz.35 |
< |
Aerosol PCR kontaminasyonu, şüpheli (gri alan) numunelerin tekrar test edilmesi gerekir. |
|
Numune |
Listeria |
Listeria |
|
pozitif |
|
35 |
|
<C |
T |
|
|
Listeria |
şüpheli, tekrar test ile doğrulayın. |
|
|
CT>40 veya CT yok |
Listeria |
|
|
|
|
|
|
|
|