Enterohemorragik Escherichia coli için gıda güvenliği hızlı test kiti EHEC Dondurma kurutulmuş gerçek zamanlı PCR rejanı ile tespit Soğuk zinciri gerekmez

1. AÇIKLAMA

Enterohemorajik Escherichia coli (EHEC),insanlarda hemorajik ishal ve enterite neden olabilen bir grup E. coli

 suşudur ve en temsilci suş O157:H7 serotipidir. Gıda kaynaklı enfeksiyonlarda kontaminasyon kaynakları arasında sığır eti, çiğ süt, kümes hayvanları ve ürünleri ile meyve ve sebzeler bulunur; sığır eti ise birincil bulaşma aracıdır.Bu ürün,  Escherichia coli O157:H7 Escherichia coli  O157:H7 geni olan O157:H7 Şablon DNA hariç tüm gerekli bileşenleri içeren bir mastermix'tir ve kolay kullanım için PCR tüplerinde tek test olarak önceden dağıtılmıştır. Bu ürün, nakliye ve depolama için soğuk zincir gerektirmez, bu da nakliye maliyetini önemli ölçüde azaltır ve reaktif israfı ve aerosol kontaminasyonu ile olası kayıpları ortadan kaldırır. 2. ÖZELLİKLER VE BİLEŞİM

Katalog No.

VE RAF ÖMRÜ  Ortam sıcaklığında saklayın

(5-30°C )CT25μl Vakum paketi açıldıktan sonra, kullanılmayan ürünleri kurutucu maddelerle birlikte sağlanan yeniden kapatılabilir plastik torbada ve alüminyum folyo torbada saklayınız. Reaktif peletinin küçülmesi, tüpe nem sızdığının ve reaktifin nemlendiğinin bir göstergesidir. Normalden önemli ölçüde daha küçük pelet boyutuna sahip herhangi bir reaktif atılmalı veya numune testi için kullanımdan önce pozitif kontrol ile test edilmelidir.   4. GEREKLİ EK EKİPMANLAR VE REAKTİFLER 

1)  

Gerçek zamanlı PCR cihazı 2) Pipet

 ve uçlar

Uygun bir ekstraksiyon kiti kullanarak numunelerden Nükleaz

 TE tamponu veya nserbest su4) Nükleik asit ekstraksiyon kiti

. Sağlanan tüpler cihazınızla uyumlu değilse, reaktif peletini cihazınızla uyumlu bir optik tüpe aktarın.ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.6. KABUL EDİLEBİLİR NUMUNELER

Amplifikasyon7. İŞLEM PROSEDÜRÜ

1) 

Nükleik

sit

E

kstraksiyonu

Uygun bir ekstraksiyon kiti kullanarak numunelerden DNACTDNA'nınekstraksiyonunson adımında yaklaşık 100μl elüsyon tamponu

(TEveya nükleaz içermeyen H2OD ile elüe edilmesi önerilir. Saflaştırılmış nükleik asit hemen kullanılmalı veya -20°C'de saklanmalıdır.2) _azırlığıPozitif kontrol, rehidrasyondan önce ortam sıcaklığında25μlsaklanabilir.Kullanımdan önceOμl

 TE tamponu veya nükleaz içermeyen

H 2Oeklenerek rehidre edilmelidir, düşük hızda 15-20 saniye vortekslenir ve düşük hızda 15-20 saniye santrifüjlenir. Hemen kullanın veya -20°C'de saklayın.3) Gerçek Zamanlı PCR Karışımı H_azırlığıA) Vakum paketini açın ve reaktifi içeren 8 tüplü şeridi çıkarın. Peletin tüpün dibinde olup olmadığını kontrol edin(GerekirseCT

. Sağlanan tüpler cihazınızla uyumlu değilse, reaktif peletini cihazınızla uyumlu bir optik tüpe aktarın.B) Tüpleri açın ve kapağı/kapakları atın (gerçek zamanlı PCR makineleri için uygun değildir) ve reaksiyon karışımını buz üzerinde aşağıdaki gibi hazırlayın.BileşenHacim / test Dondurularak kurutulmuş reaktif1

tüp (2μl)Şablon  DNA/Pozitif Kontrol/Negatif Kontrol* 23μlToplam25μl* Negatif kontrol olarak nükleaz içermeyen su kullanılabilir.

C)

4

°C3dakika

1

Amplifikasyon9

4 °C

CT>40 veya CT yokKontaminasyon yok, deney geçerli.CT<35Çapraz kontaminasyon, deney geçersiz.35